1. Bemutatkozás
A szalicilsavhoz hasonló szerkezetű kálium-{0}}metoxi-szalicilát (4MSK) egy új gyógyászati fehérítő összetevő, amelyet a kozmetikában fehérítő hatása miatt használnak, és hatékony összetevő a kozmetikumokban. Javítja a bőrtónus egyensúlyát, enyhíti a túlzott pigmentációt, korrigálja az epidermisz atipikus proliferációját, elősegíti a melanin kiválasztását, valamint megelőzi a szeplők és foltok kialakulását.

2. Főbb funkciók
A pigmentáció, a szeplők és az átlátszóság hiánya sok ázsiai nő számára problémát jelent, ezért a bőrvilágosító termékek nagy érdeklődésre tartanak számot az ázsiai nők számára. A kálium-{0}}metoxiszalicilát hatékonyságát vezető kozmetikai cégek tanulmányozták, és az eredményeket az alábbiakban mutatjuk be.
2.1. A melanogenezis gátlása
Egér melanoma sejteket (B16) három napig tenyésztettünk 4MSK jelenlétében és hiányában, és mértük a sejtek számát és a termelt melanin mennyiségét adott számú sejtnél. Meghatároztuk a sejtek számának és a melanin mennyiségének 4MSK jelenlétében és a 4MSK hiányában lévő melanin mennyiségének arányát, és így elemeztük a 4MSK melanogenezisre gyakorolt hatását.
Az eredmények azt mutatják, hogy a sejtek száma és a melanin mennyisége 3 napos 4MSK hozzáadása után a 2. ábrán látható. Megerősítést nyert, hogy a 4MSK koncentrációfüggő gátló hatással volt a melanogenezisre, és a Williams teszt eredményei szerint statisztikailag szignifikáns a 3 x 10-4 és 10-3 mol/L addíciós klaszterek esetében, összehasonlítva a 4MSK hozzáadásának hiányával. Azonban a 4MSK egyik vizsgált koncentrációja esetében sem találtunk hatást a sejtproliferációra.

2.2. A kuraminidáz aktivitás impedanciája
A tirozináz aktivitás értékeléséhez nem sejtes rendszerekben a szubsztrát L-DOPA volt, és a metabolizmusából származó dopakróm termelés mennyiségét 475 nm-es abszorbancia teszttel határoztuk meg.
A tirozináz aktivitás 4MSK általi impedanciájának sebességét úgy határoztuk meg, hogy a fenti reakciórendszerhez 4MSK-oldatot és lizátumot adtunk, majd ezt az elegyet 90 másodpercig szobahőmérsékleten hagytuk reagálni, így a 4MSK-oldat hozzáadásakor mért értékek aránya a 4MSK-oldathoz viszonyítva. lizátum csoport.

2.3. Az UV által kiváltott hatások gátlása a keratinociták differenciálódásában
Közvetlenül a 3D bőrmodell UV fénnyel történő besugárzása után 4MSK oldatot adtunk a bőrmodell felületére, 30 percig inkubáltuk, majd a 4MSK-t eltávolítottuk és 1 napig inkubáltuk. A 4MSK-oldatot kontroll célból lizáló táptalajra cseréltük. Az inkubálás után mintavételezett bőrmodelleket anti-tropin antitestekkel festettük meg immunhisztokémiai vizsgálatokhoz, és instant RT-PCR-rel (reverz transzkripciós-polimeráz láncreakció) a tropin mRNS expressziójának mennyiségi meghatározásához.
Az anti-trofoblaszt antitestekkel végzett immunhisztokémiai vizsgálatok eredményeként a háromdimenziós bőrmodell hasonló volt az in vivo teszthez, a szemcsés réteg közelében egy trofoblaszt fehérje, a differenciálódás markere volt jelen. Ennek a bőrmodellnek az UV-kutakban történő egynapos inkubálása után a troponin expressziója csökkent. A 4MSK hozzáadása a bőrmodellhez közvetlenül az UV besugárzás után szignifikánsan elnyomta a troponin expresszió UV által kiváltott csökkenését.
Ezenkívül az ugyanabból a bőrmodellből kivont RNS kvantitatív PCR elemzése azt mutatta, hogy a taurolithionein mRNS expressziójának csökkenése az UV-besugárzott csoportban elnyomott a 4MSK-val hozzáadott csoportban. Az immunhisztokémiai vizsgálatokkal alátámasztott eredmények, azaz a troponin expressziójának fehérjeszintű csökkenése és a 4MSK expresszió csökkenésének visszaszorítása mRNS szinten is igazolódott.

2.4 Emberi pigmentációt védő hatás
Tizenkét egészséges felnőtt férfi önkéntest a has 4 pontján UVA és UVB hullámhossznak tettek ki 3 napon keresztül mesterséges UV fényforrással, az lMED-nek (minimális erythema dózis) egyenértékű naponta egyszer minden kísérleti alany esetében. Négy krémet, 1 százalékos, 3 százalékos, 5 százalékos 4MSK-t és egy alapkrémet használtunk vizsgálati mintaként, és naponta háromszor alkalmaztuk az UV-expozíció kezdetétől számított 7 napon keresztül. A hiperpigmentáció mértékének értékeléséhez a bőrtónust az alkalmazás előtt és után kétszer megmértük színtesztelővel, és átlagoltuk, hogy megkapjuk az expozíció előtti és utáni változás mértékét, összehasonlítva azokat a területeket, ahol a 4MSK krémek különböző koncentrációit alkalmazták azokkal a területekkel, ahol felvitték az alapkrémeket.
Mind a 12 férfi alanyt használták alanyként. Az alanyok átlagéletkora 38,4 év volt. Az egyes alkalmazási helyekre vonatkozó L* értékeket a tesztcikk alkalmazása előtt az la táblázat mutatja. Az L* értékeket minden vizsgálati helyen elemezték a tesztcikk felvitele előtt, és megerősítették, hogy a teszt megkezdése előtt nem volt különbség a bőrtónusban a helyek között.
Az alábbi ábrán láthatók az egyes vizsgálati helyekre vonatkozó ΔL értékek a vizsgálati cikk felvitele előtt és 7 nappal az alkalmazás után. Az 1 százalékos 4MSK-krém alkalmazási helyének ΔL-je statisztikailag szignifikánsan kisebb volt, mint az alapkrém alkalmazási helyének ΔL-je. Továbbá a ΔL fokozatosan kisebb lett a 4MSK tartalom növekedésével, ami arra a következtetésre jutott, hogy a 4MSK dózisfüggő anti-pigmentációs hatással rendelkezik. Ezenkívül a vizsgálati időszak alatt nem figyeltek meg bőrelváltozást, például duzzanatot, bőrpírt vagy viszkető rákot.

2.5. Javítja a keratinocita proliferáció és differenciálódás egyensúlyhiányát és elősegíti a melanin zökkenőmentes felszabadulását
A melanocitákon végzett vizsgálatok a melanogenezis szignifikáns gátlását mutatták ki 3 x 10-4 mol/L koncentrációban, teljes potenciállal a meglévő fehérítő hatóanyagokhoz képest. A melanintermelés gátlásának hatásmechanizmusával, illetve a melanintermeléshez szükséges kuraminidáz enzim aktivitásának gátlásával kapcsolatos vizsgálatok kimutatták, hogy a 4MSK nemcsak a melanintermelést gátolja, hanem a kuraminidáz aktivitását is gátolja.
Ismeretes, hogy a pigmentáció fő oka az UV-fény, amely átmeneti rendellenességet okoz a differenciációs markerek expressziójában a keratinképző sejtekben. Megállapításaink alapján, miszerint a differenciálódási marker egyensúlyhiánya krónikus a pigmentáció helyén UV besugárzás nélkül is, vizsgálatot végeztünk a differenciálódási marker 4MSK általi normalizálására. Háromdimenziós bőrmodell segítségével kimutattuk, hogy a 4MSK védekező hatást fejt ki a tropomiozin, a keratinocita differenciálódás markere kiegyensúlyozatlan expressziója ellen, mind mRNS, mind fehérje szinten.

Másodszor, az in vivo tesztek megerősítették, hogy a 15% 4MSK-t tartalmazó tesztterméknek koncentrációfüggő védőhatása van az UV-pigmentáció ellen. A 4MSK-t tartalmazó teszttermék használata miatt nem észleltek bőrelváltozást a teljes vizsgálati időszak alatt, ami a 4MSK-t biztonságossá és hatékonysá teszi kozmetikai összetevőként.
In vitro vizsgálatok megerősítették a 4MSK közvetlen gátló hatását a melanogenezisre, valamint a keratinképző sejtek proliferációjára és differenciálódására gyakorolt hatását. Mindkét hatás védekező hatással van a melanin termelésére és felszabadulására, ami felesleges melaninlerakódásokat okoz a bőrben. Az in vivo tesztek kimutatták, hogy a 4MSK kiváló védelem az UV-pigmentáció ellen, ezért úgy gondolják, hogy a 4MSK hatékony a pigmentáció, a szeplők és a bőr melaninfelesleg formájában jelentkező tompaság ellen is.

3. Alkalmazások

A kálium-4-metoxiszalicilátot főként kozmetikai termékekben használják.

4. Folyamatábra

2,4-Dihidroxi-benzoesav → lúgos vizes nátrium-hidroxid oldat hozzáadása → feloldás → lehűtés → → pH beállítása → kicsapás → centrifugálás → öblítés → szárítás → nyers 4-metoxi-szalicilsav → melegítés → keverés → kivonat szűrő → száraz → tiszta 4-metoxiszalicilsav → állítsa be a pH-t → keverje 3 → az oldószer visszanyerése → kristályosítás lehűtése → kivonat szűrő → nyers 4-metoxiszalicilsav kálium → nyers feloldása → színtelenítés → kivonat szűrő → kristályosítás hűtése → vákuum száraz → tiszta 4-metoxiszalicilsav-kálium

5. Minőségi szabvány

Enterprise Standard szerint

Tételek	Műszaki adatok	Eredmények
Kinézet	Fehér vagy törtfehér por	fehér por
Azonosítás	HPLC, NMR, LC-MS	Megfelel a szabványnak
Nehéz fémek	20 ppm vagy annál kisebb	<20ppm
Mint	Kisebb vagy egyenlő 2ppm	<2ppm
Szárítási veszteség	Kisebb vagy egyenlő 0,5 százalék	0,29 százalék
Egyetlen szennyeződés	Kisebb vagy egyenlő, mint 1.0 százalék	Megfelel
Vizsgálat (HPLC)	Nagyobb vagy egyenlő, mint 98.0 százalék	98,56 százalék